Кратко:
- Диссертант: Ефремов Руслан Геннадьевич
- Название диссертации: "Исследование структуры и механизма функционирования ретиналь-содержащих мембранных белков: кристаллизация и фиксация промежуточных состояний белков в кристаллах"
- Дата защиты: 13.10.2005
- Язык диссертации: русский
- Ученая степень, отрасль науки: кандидат физико-математических наук
- Шифр специальности: 03.00.02 – биофизика
Цель и задачи исследования заключались в улучшении дифракционного качества белковых кристаллов, выращенных в липидной кубической фазе, исследовании влияния кристаллического окружения белков на их функциональность спектроскопическими методами и определении оптимальных условий фиксирования промежуточных состояний белков в кристаллах при низких температурах
Основные результаты: В работе впервые применен метод дифракции нейтронов для изучения механизма кристаллизации в кубической фазе. Благодаря этому оказалось возможным исследование эволюции свойств липидной фазы в процессе кристаллизации и роста кристаллов на одних и тех же образцах. В процессе оптимизации кристаллизационных условий было обнаружено, что концентрация детергента является важным кристаллизационным параметром, и ее оптимальный выбор позволяет существенно улучшить дифракционное качество кристаллов и воспроизводимость кристаллизационных экспериментов. В данной работе впервые показано, что двойниковые кристаллы белка могут быть расщеплены на одиночные без нарушения кристаллической структуры. Предложенный подход позволил получить кристалл бактериородопсина без двойникования, с которого были собраны дифракционные данные с разрешением 1.3 Å. В результате разработки нового экспериментального оборудования впервые удалось провести спектроскопические эксперименты на белковых кристаллах с микросекундным временным разрешением в инфракрасном диапазоне. Это дало возможность установить влияние кристаллического окружения и кристаллической упаковки белков на функциональность бактериородопсина и комплекса сенсорного родопсина II с трансдьюсером. В комбинации с низкотемпературной спектроскопией данный подход позволил наиболее детальную характеристику зафиксированных в кристалле промежуточных состояний. Результаты могут быть использованы в ИК РАН, ИФХБ МГУ, МФТИ, ИБХ РАН, ИТЭБ РАН, ЛНФ ОИЯИ
Доступные материалы:
- Автореферат (PDF, 1,30 Мб)
