Крындушкин Дмитрий Сергеевич

Кратко:

Цель работы: Идентифицировать белки, существенные для поддержания прионных детерминантов [PSI⁺ ] и [PSI⁺ _PS ] в клетках S. cerevisiae, и выяснить механизмы их участия в этом процессе. Разработать биохимические подходы, позволяющие определить структурную организацию прионных частиц в клетках S. cerevisiae и оценить влияние различных воздействий на структуру прионных агрегатов детерминантов [PSI⁺ ] и [PSI⁺ _PS ].

Основные результаты: В работе был впервые проведен систематический поиск белков, участвующих в поддержании прионных детерминантов [PSI⁺ ] и [PSI⁺ _PS ] у дрожжей S. cerevisiae. Было выявлено несколько эволюционно-консервативных белков-шаперонов из семейств Hsp70 и Hsp40, присутствующих как у дрожжей, так и у млекопитающих, что позволяет предполагать возможность использования регуляции экспрессии этих белков для лечения прионных болезней человека. Кроме того, было обнаружено, что другие идентифицированные белки (транскрипционные факторы Ssn8 и Sfl1, а также рибосомный белок Rpp0) влияют на стабильность детерминантов опосредованно, регулируя экспрессию шаперонов на уровне транскрипции. Разработан оригинальный метод очистки и анализа дрожжевых прионов, который позволил получить новые данные о структурной организации прионных агрегатов и установить их размер, а также позволил обнаружить различия между штаммами прионного детерминанта на молекулярном уровне. Данный метод был применен для анализа механизмов действия различных факторов, вызывающих элиминацию прионных детерминантов [PSI⁺ ] и [PSI⁺ _PS ], таких как уменьшение количества шаперона Hsp104, добавление в среду для роста дрожжей гидрохлорида гуанидина, сверхэкспрессия шаперона Sis1. 

Доступные материалы: